Salkowskijev test
Salkowskijev test, ponekod tudi kot Salkowski test, je kvalitativni kemijski test, ki se uporablja za dokazovanje prisotnosti holesterola in drugih sterolov.[1][2][3] Ta biokemijska metoda je svoje ime dobila po nemškem biokemiku Ernstu Leopoldu Salkowskiju[1], ki je znan predvsem po številnih novih testih, uporabljenih za detekcijo različnih molekul (poleg holesterola in drugih sterolov tudi kreatinina, ogljikovega monoksida, glukoze in indolov).[4] Raztopina s pozitivno reakcijo Salkowskijevega testa se obarva rdečkasto z rumenim sijajem.[5]
Osnovne informacije
[uredi | uredi kodo]Postopek
[uredi | uredi kodo]Za izvajanje Salkowskijevega testa so potrebni vzorec, ki ga želimo testirati za sterole, kloroform in koncentrirana žveplova kislina. Metoda se lahko izvede tako, da se v epruveto s kloroformom (denimo 2 mililitra[5]) prilije (ali odpipetira) 2 mililitra izbranega vzorca, nakar se tako pripravljeni raztopini ob robu epruvete s kapalko doda 2 mililitra koncentrirane žveplove (VI) kisline. Raztopino se zatem s pomočjo tresenja zmeša.[1][5] Ključno je, da se pri postopku uporablja zgolj suho steklovino, ker pride do dehidracijske reakcije.[6]
Pozitivno reakcijo test pokaže tako, da gornji sloj (kloroform) v epruveti dobi modrikasto rdečo do vijolično barvo, medtem ko se plast žveplove kisline obarva rumeno do zeleno (viden je zelenkast sijaj[7]). Pri negativni reakciji spremembe barve raztopine ni (prozorna raztopina ohrani svojo prozornost).[1][8][9][10]
Salkowskijev test se lahko uporabi tudi za dokazovanje prisotnosti indolov (kristaličnih alkaloidov, ki nastajajo pri razpadu beljakovin, vsebujočih triptofan[11]). V takšnem primeru se vzorcu doda dušikova kislina in 2-odstotni kalijev nitrit, na pozitivno reakcijo test opozori z rdečim obarvanjem.[7]
Kemizem testa
[uredi | uredi kodo]Dodatek močno higroskopne žveplove kisline vzorcu holesterola, raztopljenega v kloroformu, vodi v dehidracijsko reakcijo (dve vodni molekuli se odstranita iz dveh molekul holesterola) in tvorbo dodatnih (alkenskih) dvojnih vezi. Med kemijsko reakcijo se med seboj povežeta dva sterola in nastane bisterol (bisteroid); v primeru holesterola bi-holestadien. Rdeča barva raztopine je posledica bisulfonske kisline, ki nastane kot produkt biholestadiena, ki ga sulfonira žveplova kislina.[10][12][13]
Glej tudi
[uredi | uredi kodo]Sklici
[uredi | uredi kodo]- ↑ 1,0 1,1 1,2 1,3 »Salkowski test for cholesterol - Its principle and procedure«. Medical Study Zone (v ameriški angleščini). 5. april 2017. Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ »Salkowski test«. Oxford Reference (v angleščini). doi:10.1093/oi/authority.20110803100438192. Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ ariannarecio (14. januar 2012). »Lipids1«. Pridobljeno 10. maja 2021.
{{navedi revijo}}: Sklic magazine potrebuje|magazine=(pomoč) - ↑ Djordjevic, Svetolik P.; Djordjević, Svetolik P. (2004). Dictionary of Medicine: French-English with English-French Glossary (v angleščini). Schreiber Pub. ISBN 978-1-887563-84-0.
- ↑ 5,0 5,1 5,2 Zahim, Duaa; Al-Saedi, Dalal. »General Biochemistry« (PDF). Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ Sharma, D. C. (2007). Practical Medical Biochemistry (v angleščini). BI Publications Pvt Ltd. ISBN 978-81-7225-246-5.
- ↑ 7,0 7,1 »Salkowski test«. Academic Dictionaries and Encyclopedias (v angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ »Salkowski-Probe«. Academic dictionaries and encyclopedias (v nemščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ »Salkowski test«. Chemwatch (v ameriški angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ 10,0 10,1 »SCIENCE bio«. www.coursehero.com. Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ »Definition of INDOLE«. www.merriam-webster.com (v angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
- ↑ Selan, Karmen (2008). »Vrednotenje izbranih kolorimetričnih metod za določanje koncentracije steroidov : diplomsko delo«. repozitorij.uni-lj.si. Pridobljeno 22. avgusta 2021.
- ↑ »How does Salkowski's Test for Steroid content work?«. ResearchGate (v angleščini). Pridobljeno 22. avgusta 2021.
