Pojdi na vsebino

Salkowskijev test

Iz Wikipedije, proste enciklopedije

Salkowskijev test, ponekod tudi kot Salkowski test, je kvalitativni kemijski test, ki se uporablja za dokazovanje prisotnosti holesterola in drugih sterolov.[1][2][3] Ta biokemijska metoda je svoje ime dobila po nemškem biokemiku Ernstu Leopoldu Salkowskiju[1], ki je znan predvsem po številnih novih testih, uporabljenih za detekcijo različnih molekul (poleg holesterola in drugih sterolov tudi kreatinina, ogljikovega monoksida, glukoze in indolov).[4] Raztopina s pozitivno reakcijo Salkowskijevega testa se obarva rdečkasto z rumenim sijajem.[5]

Osnovne informacije[uredi | uredi kodo]

Postopek[uredi | uredi kodo]

Za izvajanje Salkowskijevega testa so potrebni vzorec, ki ga želimo testirati za sterole, kloroform in koncentrirana žveplova kislina. Metoda se lahko izvede tako, da se v epruveto s kloroformom (denimo 2 mililitra[5]) prilije (ali odpipetira) 2 mililitra izbranega vzorca, nakar se tako pripravljeni raztopini ob robu epruvete s kapalko doda 2 mililitra koncentrirane žveplove (VI) kisline. Raztopino se zatem s pomočjo tresenja zmeša.[1][5] Ključno je, da se pri postopku uporablja zgolj suho steklovino, ker pride do dehidracijske reakcije.[6]

Pozitivno reakcijo test pokaže tako, da gornji sloj (kloroform) v epruveti dobi modrikasto rdečo do vijolično barvo, medtem ko se plast žveplove kisline obarva rumeno do zeleno (viden je zelenkast sijaj[7]). Pri negativni reakciji spremembe barve raztopine ni (prozorna raztopina ohrani svojo prozornost).[1][8][9][10]

Salkowskijev test se lahko uporabi tudi za dokazovanje prisotnosti indolov (kristaličnih alkaloidov, ki nastajajo pri razpadu beljakovin, vsebujočih triptofan[11]). V takšnem primeru se vzorcu doda dušikova kislina in 2-odstotni kalijev nitrit, na pozitivno reakcijo test opozori z rdečim obarvanjem.[7]

Kemizem testa[uredi | uredi kodo]

Dodatek močno higroskopne žveplove kisline vzorcu holesterola, raztopljenega v kloroformu, vodi v dehidracijsko reakcijo (dve vodni molekuli se odstranita iz dveh molekul holesterola) in tvorbo dodatnih (alkenskih) dvojnih vezi. Med kemijsko reakcijo se med seboj povežeta dva sterola in nastane bisterol (bisteroid); v primeru holesterola bi-holestadien. Rdeča barva raztopine je posledica bisulfonske kisline, ki nastane kot produkt biholestadiena, ki ga sulfonira žveplova kislina.[10][12][13]

Glej tudi[uredi | uredi kodo]

Sklici[uredi | uredi kodo]

  1. 1,0 1,1 1,2 1,3 »Salkowski test for cholesterol - Its principle and procedure«. Medical Study Zone (v ameriški angleščini). 5. april 2017. Pridobljeno 10. maja 2021.
  2. »Salkowski test«. Oxford Reference (v angleščini). doi:10.1093/oi/authority.20110803100438192. Pridobljeno 10. maja 2021.
  3. ariannarecio (14. januar 2012). »Lipids1«. Pridobljeno 10. maja 2021. {{navedi revijo}}: Sklic magazine potrebuje|magazine= (pomoč)
  4. Djordjevic, Svetolik P.; Djordjević, Svetolik P. (2004). Dictionary of Medicine: French-English with English-French Glossary (v angleščini). Schreiber Pub. ISBN 978-1-887563-84-0.
  5. 5,0 5,1 5,2 Zahim, Duaa; Al-Saedi, Dalal. »General Biochemistry« (PDF). Pridobljeno 10. maja 2021.
  6. Sharma, D. C. (2007). Practical Medical Biochemistry (v angleščini). BI Publications Pvt Ltd. ISBN 978-81-7225-246-5.
  7. 7,0 7,1 »Salkowski test«. Academic Dictionaries and Encyclopedias (v angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
  8. »Salkowski-Probe«. Academic dictionaries and encyclopedias (v nemščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
  9. »Salkowski test«. Chemwatch (v ameriški angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
  10. 10,0 10,1 »SCIENCE bio«. www.coursehero.com. Pridobljeno 10. maja 2021.
  11. »Definition of INDOLE«. www.merriam-webster.com (v angleščini). Pridobljeno 10. maja 2021.
  12. Selan, Karmen (2008). »Vrednotenje izbranih kolorimetričnih metod za določanje koncentracije steroidov : diplomsko delo«. repozitorij.uni-lj.si. Pridobljeno 22. avgusta 2021.
  13. »How does Salkowski's Test for Steroid content work?«. ResearchGate (v angleščini). Pridobljeno 22. avgusta 2021.